2.4.28 Kyselina 2-ethylhexanová
2000
Stanoví se plynovou chromatografií (2.2.28) za použití kyseliny 3-cyklohexylpropionové R jako vnitřního standardu.
Roztok vnitřního standardu. 100 mg kyseliny 3-cyklohexylpropionové R se rozpustí v cyklohexanu R a zředí se jím na 100 ml.
Zkoušený roztok. K 0,300 g zkoušené látky se přidají 4,0 ml roztoku kyseliny chlorovodíkové R 33% (V/V) a silně se dvakrát 1 min třepe, vždy s 1,0 ml roztoku vnitřního standardu. Fáze se nechají oddělit (je-li nezbytné, použije se k lepšímu oddělení odstřed'ování). Použijí se spojené horní vrstvy.
Porovnávací roztok. 75,0 mg kyseliny 2-ethylhexanové R se r ozpustí v roztoku vnitřního standardu a zředí se jím na 50,0 ml. K 1,0 ml r oztoku se přidají 4,0 ml roztoku kyseliny chlorovodíkové R 33% (V/V) a 1 min se silně třepe. Fáze se nechají oddělit (je-li nezbytné, použije se k lepšímu oddělení odstřed'ování). Ke spodní vrstvě se přidá 1,0 ml roztoku vnitřního standardu a silně se 1 min třepe. Fáze se nechají oddělit (je-li nezbytné, použije se k lepšímu oddělení odstřed'ování). Použijí se spojené horní vrstvy.
Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- křemenné kapilární kolony délky 10 m a vnitřního průměru 0,53 mm s vnitřní stěnou pokrytou makrogolem 20 000 2-nitrotereftalatem R (tloušťka vrstvy je 1,0 μm),
- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 10 ml/min,
- plamenoionizačního detektoru,
s následujícím teplotním programem:
| Čas (min) |
Teplota (°C) |
Rychlost (°C/min) |
Poznámka | |
|---|---|---|---|---|
| kolona | 0 - 2 | 40 | izotermicky | |
| 2 - 7,3 | 40 → 200 | 30 | lineární gradient | |
| 7,3 - 10,3 | 200 | izotermicky | ||
| nástřikový prostor | 200 | |||
| detektor | 300 |
Nastříkne se 1 μl zkoušeného roztoku a 1 μl porovnávacího roztoku. zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky odpovídajícími kyselině 2-ethylhexanové (první pík) a vnitřnímu standardu není menší než 2,0.
Obsah kyseliny 2-ethylhexanové v procentech se vypočítá podle vzorce:
| AT · IR · mR · 2 | , |
| AR · iT· mT |
v němž značí:
| AT | - plochu píku kyseliny 2-ethylhexanové na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| AR | - plochu píku kyseliny 2-ethylhexanové na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| IT | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| IR | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| mT | - hmotnost zkoušené látky v gramech ve zkoušeném roztoku, |
| mR | - hmotnost kyseliny 2-ethylhexanové v gramech v porovnávacím roztoku. |