Bromocriptini mesilas

2001

Bromokriptiniummesilat

Je to bromokriptiniummethansulfonat¹⁾, tj. (6aR, 9R)-5-brom-9-{[[(2R, SS, 10aS, 10bS)-10b-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2, 1-c]pyrazin-2-yl]amino]karbonyl}-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]chinolin-7-ium-methansulfonat²⁾. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,0 % až 101,0 % sloučeniny C₃₃H₄₄BrN₅O₈S.

Vlastnosti

Bílý nebo slabě zbarvený jemný krystalický prášek. Je velmi citlivý na světlo, prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v methanolu, dobře rozpustný v lihu 96%, mírně rozpustný v dichlormethanu.

Zkoušky totožnosti, zkoušky na čistotu a stanovení obsahu se provádějí co nejrychleji a za chránění před světlem!

Zkoušky totožnosti

Základní sestava zkoušek: B.

Alternativní sestava zkoušek: A, C, D a E, viz Obecné zásady (1.2.).

1. 10,0 mg se rozpustí v 10 ml methanolu R a zředí se kyselinou chlorovodíkovou 0,01 mol/l RS na 200,0 ml. Měří se absorbance (2.2.25) při 250 nm až 380 nm; roztok vykazuje absorpční maximum při 305 nm a minimum při 270 nm. Specifická absorbance v maximu je 120 až 135, počítáno na vysušenou látku.
2. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky odpovídá spektru bromokriptiniummesilatu CRL.
3. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu G pro TLC R.

   Roztoky se připraví bezprostředně před použitím.

   Zkoušený roztok. 10 mg se rozpustí ve směsi objemových dílů lihu 96% R, methanolu R a dichlormethanu R (3 + 3 + 4) a zředí se stejnou směsí na 10 ml.

   Porovnávací roztok. 10 mg bromokriptiniummesilatu CRL se rozpustí ve směsi objemových dílů lihu 96% R, methanolu R a dichlormethanu R (3 + 3 + 4) a zředí se stejnou směsí na 10 ml.

   Na vrstvu se odděleně nanese po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se ihned v nenasycené komoře směsí objemových dílů amoniaku 26% R, vody R, 2-propanolu R, dichlormethanu R a etheru R (0,1 + 1,5 + 3 + 88 + 100) po dráze 15 cm. Vrstva se 2 min suší v proudu studeného vzduchu, postříká se molybdenanem amonným RS3 a zahřívá se při 100 °C do objevení skvrn (asi 10 min). Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá polohou, zbarvením a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku.

4. K 0,1 g se přidá 5 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS, asi 5 min se třepe, zfiltruje se a přidá se 1 ml chloridu barnatého RSl; filtrát zůstane čirý. K dalšímu 0,1 g se přidá 0,5 g uhličitanu sodného bezvodého R, promíchá se a žíhá do vzniku bílého zbytku. Po vychladnutí se zbytek rozpustí v 7 ml vody R, (roztok A), uchová se také pro zkoušku E. Roztok A vyhovuje zkoušce (a) na sírany (2.3.1).
5. Roztok A ze zkoušky D vyhovuje zkoušce (a) na bromidy (2.3.1).

Zkoušky na čistotu

Vzhled roztoku. 0,25 g se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 25 ml. Tento roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzívněji než porovnávací barevný roztok H₅, HŽ₅ nebo Ž₅ (2.2.2, Metoda II).

Hodnota pH (2.2.3). 3,1 až 3, 8; měří se roztok připravený takto: 0,2 g se rozpustí ve směsi objemových dílů methanolu R a vody prosté oxidu uhličitého R (2 + 8) a zředí se stejnou směsí na 20 ml.

Specifická optická otáčivost (2.2.7). +95° až +105°, počítáno na vysušenou látku; měří se roztok připravený rozpuštěním 0,100 g ve směsi stejných objemových dílů methanolu R a dichlormethanu R a zředěním stejnou směsí na 10,0 ml.

Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

Zkoušený roztok. 0,500 g se rozpustí v 5,0 ml methanolu R a zředí se tlumivým roztokem o pH 2,0 na 10,0 ml.

Porovnávací roztok (a). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí směsí stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R na 100,0 ml.

Porovnávací roztok (b). 1,0 ml porovnávacího roztoku (a) se zředí směsí stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R na 10,0 ml.

Porovnávací roztok (c). 5,0 mg bromokriptinu nečistoty A CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R a zředí se stejnou směsí na 5,0 ml.

Porovnávací roztok (d). 5,0 mg bromokriptinu nečistoty B CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R a zředí se stejnou směsí na 5,0 ml.

Porovnávací roztok (e). 0,5 ml porovnávacího roztoku (c) se smíchá s 0,5 ml porovnávacího roztoku (d) a zředí směsí stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R na 10,0 ml.

Porovnávací roztok (f). 1,0 ml porovnávacího roztoku (c) se zředí směsí stejných objemových dílů tlumivého roztoku o pH 2,0 a methanolu R na 100,0 ml.

Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

• nerezové ocelové kolony délky 0,12 m a vnitřního průměru 4 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
• mobilní fáze s průtokovou rychlostí 2 ml/min:
  • mobilní fáze A - roztok uhličitanu amonného R (0,791 g/l),
  • mobilní fáze B - acetonitril R,

  Čas (min)	Mobilní fáze A % (V/V)	Mobilní fáze B % (V/V)	Poznámky
  0 - 30	90 → 40	10 → 60	lineární gradient
  30 - 45	40	60	izokraticky

• spektrofotometrického detektoru, 300 nm.

 Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (e). Citlivost systému se nastaví tak, aby výšky dvou píků byly asi 20 celé stupnice zapisovače. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky nečistoty A a nečistoty B je nejméně 1,1. 
 Nastříkne se po 20 μl všech ostatních roztoků. Na chromatogramu zkoušeného roztoku není plocha píku odpovídajícího nečistotě A větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (f) (0,02 %), plocha píku odpovídajícího nečistotě C, s relativním retenčním časem asi 1, 2, není větší než čtyřnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,4 %), plocha žádného píku, kromě hlavního píku a píku nečistoty C, není větší než dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,2 %) a nejvýše jeden takový pík má plochu větší než je plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,1 %); součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než 1,5 násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (1,5 %). Nepřihlíží se k píkům, kromě píku nečistoty A, jejichž plocha je menší než polovina plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,05 %).

Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 3, 0 %; 0,500 g se 5 h suší ve vakuu při 80 °C.

Stanovení obsahu

0,500 g se rozpustí v 80 ml směsi objemových dílů kyseliny octové bezvodé R a acetanhydridu R (10 + 70) a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace (2.2.20) bodu ekvivalence.
1 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 75,1 mg C₃₃H₄₄BrN₅O₈S

Uchovávání

Ve vzduchotěsných obalech, chráněn před světlem, při teplotě nepřevyšující -15 °C.
Separandum.

Nečistoty

1. (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2R, SS)-S-isobutyl-2-isopropyl-3,6-dioxo-2,3, 5,6, 9,10-hexahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrol0[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]-chinolin-9-karboxamid³⁾ (2-bromdehydro-α-ergokriptin),
2. (6aR, 9R)-N-[(2R, 5S, 10aS, 10bS)-10b-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4, 6,6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4,3 -fg]chinolin-9-karboxamid⁴⁾ (a-ergokriptin),
3. (6aR, 9S)-5-brom-N-[(2R, SS, 10aS, 10bS)-10b-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3,6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3, 2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]chinolin-9-karboxamid⁵⁾ ((9S)-2-brom-a-ergokriptin),
4. R = OH: kyselina (6aR, 9R)-5-brom-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4,3 -fg]chinolin-9-karboxylová,
5. R = NHZ: (6aR, 9R)-5-brom-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3 fg]chinolin-9-karboxamid,
6. (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2S, SS, 10aS, 10bS)-10b-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3,6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3, 2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, ba, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3 -fg]chinolin-9-karboxamid⁶⁾ ((2'S)-2-brom-a-ergokriptin),
7. (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2R, 5S, 10aS, lObS)-5-isobutyl-2-isopropyl-10b-methoxy-3,6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3, 2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]chinolin-9-karboxamid⁷⁾ (2-brom-10 b-O-methyl-a-ergokriptin⁸⁾).

¹⁾ bromokriptinium-methansulfonát
²⁾ (6aR, 9R)-5-brom-9-({[(2R, 5S, 10aS, 10bS)-10b-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2, 1-c]pyrazin-2-yl]amino}karbonyl)-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]chinolin-7-ium-methansulfonát
³⁾ (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2R, SS)-5-isobutyl-2-isopropyl-3,6-dioxo-2,3, 5,6, 9, 10-hexahydro-BH-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4,3- fg]chinolin-9-karboxamid
⁴⁾ (6aR, 9R)-N-[(2R, SS, 10aS, 10bS)-106-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4,3 -fg]chinolin-9-karboxamid
⁵⁾ (6aR, 9S)-5-brom-N-[(2R, 5S, 10aS,10bS)-lOb-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4,3 -fg]chinolin-9-karboxamid
⁶⁾ (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2S, 5S, 10aS, 10bS)-lOb-hydroxy-5-isobutyl-2-isopropyl-3, 6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo[3,2-a] pyrrolo [2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4, 6,6a, 7,8, 9-hexahydroindolo [4, 3-fg]chinolin-9-karboxamid
⁷⁾ (6aR, 9R)-5-brom-N-[(2R, SS, 10aS, 10bS)-5-isobutyl-2-isopropyl-10b-methoxy-3,6-dioxo-oktahydro-8H-oxazolo(3, 2-a]pyrrolo[2,1-c]pyrazin-2-yl]-7-methyl-4,6, 6a, 7,8, 9-hexahydroindolo[4, 3-fg]chinolin-9-karboxamid
⁸⁾ 2-brom-10b-O-methyl-α-ergokriptin